生物樣品取材

生物樣品取材基本要求

1. 取材準備

1) 試劑 所需 2.5%戊二醛、0.1M PH7.35 的磷酸鹽緩沖液,注明配制日期及啟用日期,置于 4 攝氏度冰箱預冷(2.5%戊二醛預冷至少 1 小時以上;磷酸鹽緩沖液不宜長時間預冷,容易結晶)。

2) 儀器與器材 鋒利刀片(手術刀片或飛鷹雙面刀片)、鑷子、低溫操作臺、1.5mlEP 管、培養皿(或者硬紙卡,盛戊二醛用)、注射器(植物組織用)、冷凍離心機(細菌、細胞、藻類等需要離心的樣品使用)

2. 取材要求

1) 快

取材動作要迅速,材料離體后 1min 鐘內必須進入戊二醛固定液,使組織、細胞盡可能保持原來生活狀態,解剖器械要用鋒利的刀片(新的手術刀片或飛鷹雙面刀片) 劃切,避免牽拉或擠壓,盡量減少取材中的機械損傷。(動物處死后 5min 內完成此步驟,時間越短越好?。?/p>

2) 準

取材要準確

①器官要準確;

②部位要準確:如觀察腎臟腎小球或腦神經元需取皮質而不要取髓質, 觀察胰島盡量取胰尾。

③胃腸道、皮膚、角膜、視網膜、耳蝸、骨骼肌等要注意方向性(橫切或縱切),取材成條狀(0.5mm×1mm×3mm),確保要觀察的部位在較長的切面上。

3) 冷

取材過程應在 0~4 攝氏度的操作臺上操作(或者是冰上操作,但要注意切勿使組織直接接觸或貼近冰面,需要以操作面板隔離,以免操作時間過長而造成組織結冰出現冰晶損傷),所有器械、容器、2.5%戊二醛、PBS 需 4℃預冷足夠長的時間。

4) 小

不定位組織大小為 1mm×1mm×1mm(盡可能小,可以更小為 0.5mm×0.5mm× 1mm,越薄越好),如肝、肺、脾等不需要看特定結構的非定位器官組織;定位組織如神經、骨骼肌、腎、腦、腸、血管、胰島等組織取材大小為 0.5mm×1mm×3mm 的長條狀(越薄越好)。

 

備注:生物樣品運輸基本要求

用封口膜將 1.5mlEP 管管蓋再次封好,做好標記,填好送樣申請單(必須填,隨樣品寄出紙質版申請單)。隨后插在海綿板或可以減震的塑料上,用廢舊報紙包裹,放入 1~2 個冰袋,樣品盡可能遠離冰袋固定放置,以防樣品出現冰晶損傷。寄出。

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